Célkitűzések és lépések, amelyek részt vesznek egy kariotípusos tesztben
Ha orvosa kardiotípus tesztet ajánlott Önnek vagy gyermeke számára, vagy amniocentézis után, mit jelent ez a vizsgálat? Milyen feltételekkel lehet kariotípust diagnosztizálni, milyen lépéseket tesznek a tesztek elvégzésében és milyen korlátai vannak?
Mi a kariotípus teszt?
A kariotípus a sejtkromoszómák fényképe. A kariotípusok vérsejtekből, magzati bőrsejtekből (amniotikus folyadékból vagy placentából) vagy csontvelő sejtekből származhatnak.
Milyen állapotok diagnosztizálhatók kariotípusvizsgálattal?
A kariotípusokat használhatjuk a kromoszómális rendellenességek, például a Down-szindróma kipróbálására és megerősítésére, és számos különböző rendellenességet lehet észlelni.
Ezek egyike a triszómiák, amelyekben az egyik kromoszómának három példánya van, és nem kettő. Ezzel szemben a monoszómák akkor fordulnak elő, ha csak egy másolat (két helyett) jelenik meg. A triszómiák és a monoszómák mellett vannak olyan kromoszóma-deléciók is, amelyekben kromoszóma egy része hiányzik, és kromoszómális transzlokációk, amelyekben egy kromoszóma egy része egy másik kromoszómához kapcsolódik (és fordítva, kiegyensúlyozott transzlokációkban).
A triszómiák példái közé tartoznak a következők:
- Down-szindróma (triszómiás 21)
- Edward-szindróma ( triszómiás 18 )
- Patau-szindróma (triszómiás 13)
- Klinefelter-szindróma (XXY és egyéb változatok) - A Klinefelter-szindróma 500 újszülött férfiakban 1, és úgy tűnik, hogy növekszik az incidenciában
- Triple X-szindróma (XXX)
Egy monoszóma példája a következőket foglalja magában:
- Turner-szindróma (X0) vagy monoszomia X - A vetélések nagyjából 15 százaléka Turner-szindrómának tulajdonítható, de ez a triszómiája csak 2000-ben 1 életévben jelenik meg
A kromoszómális deléciók példái közé tartoznak a következők:
- Cri-du-Chat-szindróma (hiányzik az 5-ös kromoszóma)
- Williams-szindróma (hiányzik a kromoszóma 7)
Transzklokációk - Számos példa van a transzlokációra, beleértve a Down szindróma transzlokációját. A Robertsonianus transzlokáció meglehetősen gyakori, 1000 emberből egynél több embernél fordul elő.
A mozaikosság olyan állapot, amelyben egyes sejtek a szervezetben kromoszóma rendellenességet mutatnak, míg mások nem. Például a mozaik Down-szindróma vagy a mozaik triszómiája 9. A teljes triszómiás 9 nem kompatibilis az életével, de a mozaikos triszómiával 9 élő születést eredményezhet.
(Például érdemes ezer szót.) Ismerje meg a transzlokáció, a triszóma és a mozaik Down-szindróma közötti különbségeket.)
Mikor van Kariotípus?
Sok olyan helyzet áll fenn, amelyben a karyotípust orvosa ajánlhatja. Ezek a következők lehetnek:
- Csecsemők vagy gyermekek, akik olyan kórelőzményeket mutatnak, amelyek kromoszóma rendellenességet mutatnak, még nem diagnosztizáltak.
- A kromoszóma rendellenességre utaló tünetekkel rendelkező felnőttek (például a Klinefelter-kórban szenvedő férfiak diagnosztizálhatják a pubertás vagy a felnőttkorig.) A mozaik triszómiás rendellenességek egy része szintén nem diagnosztizálható.
- Infertilitás - A meddőséghez genetikai kariotípust lehet végezni. Amint fentebb megjegyeztük, bizonyos kromoszomális rendellenességek felnőttkori felismerés nélkül diagnosztizálhatók. A Turner-szindrómával vagy a Klinefelter egyik változatával rendelkező férfi lehet, hogy nem ismeri az állapotot, amíg nem kezelik a meddőséget.
- Prenatális tesztelés - Bizonyos esetekben, például a Down szindróma áthelyezése esetén, a feltétel örökletes lehet, és a szülők tesztelhetik, ha a gyermek Down-szindrómával született. (Fontos megjegyezni, hogy a Down-szindróma legtöbbször nem örökletes rendellenesség, hanem inkább véletlen mutáció.)
- Született szülés - A kariotípust gyakran végezik a halvaszületést követő vizsgálatok részeként.
- Ismétlődő vetélések - A visszatérő vetélések szülői kariotípusa adhat nyomokat a pusztító, ismétlődő veszteségek okairól. Úgy vélik, hogy a kromoszómális rendellenességek, például a 16-es triszómiás betegség 50% -os vetélés oka.
- Leukémia - A leukémiák diagnosztizálására a kariotípus vizsgálat is elvégezhető, például a Philadelphia kromoszómájának megkeresésével, akik krónikus myelogenous leukémia vagy akut lymphocytás leukémia esetén találhatók.
Kariotípus-tesztben résztvevő lépések
Egy kariotípus-teszt úgy hangzik, mint egy egyszerű vérvizsgálat, ami sok ember számára megkérdőjelezi, miért tart olyan sokáig az eredmények elérése. Ez a teszt valójában elég összetett a gyűjtés után. Vessünk egy pillantást ezekre a lépésekre, hogy megértsük, mi történik az idő alatt, amíg várakozik a tesztre.
1. Mintavétel
A kariotípus végrehajtásának első lépése egy minta összegyűjtése. Újszülötteknél vörösvérsejteket, fehérvérsejteket, szérumot és más folyadékokat tartalmazó vérmintát gyűjtenek. Kariotípust fognak végezni a fehérvérsejteken, amelyek aktívan elosztják (mitosis). Terhesség alatt a minta lehet amniotikus folyadék, amelyet az amniocentézis vagy a placenta egy darabja során gyűjtöttek be egy chorionis villi mintavételi teszt során (CVS). Az amniotikus folyadék magzati bőrsejteket tartalmaz, amelyeket kariotípus létrehozására használnak.
2. Szállítás a laboratóriumba
A kariotípusokat egy specifikus laboratóriumban hajtják végre, amelyet citogenetikai laboratóriumnak neveznek el - olyan laboratóriumban, amely kromoszómákat tanulmányoz. Nem minden kórházban vannak citogenetikai laborok. Ha kórháza vagy orvosi rendelője nem rendelkezik saját citogenetikai laboratóriumával, a vizsgálati mintát egy kariotípus-analízisre specializálódott laboratóriumba küldik. A vizsgálati mintát speciálisan képzett cytogenetikus technológusok, Ph.D. citogenetikusok vagy orvosi genetikusok.
3. A sejtek elválasztása
A kromoszómák elemzéséhez a mintának aktívan el kell osztania a sejteket. A vérben a fehérvérsejtek aktívan oszlanak meg. A legtöbb magzati sejt is aktívan oszlik meg. Miután a minta eléri a citogenetikai laboratóriumot, a nem osztott sejteket külön vegyi anyagokkal elválasztják az elválasztó celláktól.
4. Növekvő sejtek
Annak érdekében, hogy elegendő sejt legyen elemzésre, az elválasztó sejteket speciális tápközegben vagy sejtkultúrában tenyésztjük. Ez a hordozó olyan vegyi anyagokat és hormonokat tartalmaz, amelyek lehetővé teszik a sejtek megosztását és szaporodását. Ez a tenyésztési folyamat 3-4 napig tarthat a vérsejteknél, és egy hétig a magzati sejtekhez.
5. Cellák szinkronizálása
A kromoszómák a humán DNS hosszú sorai. A kromoszómák mikroszkóp alatt történő megtekintéséhez a kromoszómáknak a legkompaktabb formában kell lenniük a sejtosztódás (mitózis) fázisában, amelyet metafázisnak neveznek. Annak érdekében, hogy az összes sejtet a sejtosztódás ezen specifikus stádiumához kapja, a sejteket olyan vegyülettel kezeljük, amely megállítja a sejtosztódást azon a ponton, ahol a kromoszómák a legkisebbek.
6. A kromoszómák felszabadítása a sejtjeikről
Annak érdekében, hogy ezeket a kompakt kromoszómákat mikroszkóp alatt láthassák, a kromoszómáknak ki kell lépniük a fehérvérsejtekből. Ez úgy történik, hogy a fehérvérsejteket olyan speciális megoldással kezelik, amelyik felrobban. Ez akkor történik, ha a sejtek mikroszkopikus csúszkával vannak ellátva. A fehérvérsejtek maradék törmelékeit mossák el, így a kromoszómák ragasztják a csúszkát.
7. A kromoszómák festése
A kromoszómák természetesen színtelenek. Annak érdekében, hogy megmondja az egyik kromoszómát a másik, egy speciális festék nevű Giemsa festék kerül alkalmazásra a dia. A Giemsa festék foltokat tartalmaz az adenin (A) és a timin (T) bázisokban gazdag kromoszómák régióiban. Amikor megfestették, a kromoszómák könnyű és sötét zenekarokat ábrázolnak. Mindegyik kromoszómának megvilágosodott sötét sávja van, amely lehetővé teszi a citogenetikus számára, hogy egy kromoszómát mondjon el egymástól. Minden sötét vagy világos sáv több száz gént tartalmaz.
8. Elemzés
Miután a kromoszómákat megfestettük, a csúszkát a mikroszkóp alá helyeztük analízis céljából. Ezután felvett egy képet a kromoszómákról. Az elemzés végére meg kell határozni a kromoszómák teljes számát, és a méret szerint elrendezett kromoszómákat.
9. Kromoszómák számlálása
Az elemzés első lépése a kromoszómák számbavétele. A legtöbb embernek 46 kromoszóma van. A Down-szindrómás betegek 47 kromoszómával rendelkeznek. Lehetséges, hogy az emberek hiányoznak a kromoszómákkal, több mint egy kromoszómával vagy egy kromoszóma egy részével, amely vagy hiányzik vagy duplikált. Ha csak a kromoszómák számát tekintjük meg, lehetséges különböző állapotok diagnosztizálása, beleértve a Down-szindrómát.
10. Kromoszómák rendezése
A kromoszómák számának meghatározása után a citogenetikus elkezdi válogatni a kromoszómákat. A kromoszómák rendezéséhez egy citogenetikus összehasonlítja a kromoszóma hosszát, a centromerek helyét (ahol a két kromatid összekapcsolódik) és a G-sávok helyét és méretét. A kromoszóma párokat a legnagyobb (1-es számtól) a legkisebb számig (22-es szám) számozzák. 22 pár kromoszóma van, az úgynevezett autoszómák, amelyek pontosan egyeznek. Vannak még a nemi kromoszómák is, a nők két X kromoszómájával rendelkeznek, míg a hímek X-et és Y-t tartalmaznak.
11. A struktúra vizsgálata
A kromoszómák és a nemi kromoszómák teljes számának vizsgálata mellett a cytogenetikus is megvizsgálja a specifikus kromoszómák szerkezetét annak érdekében, hogy biztosítsa, hogy nincs hiányzó vagy kiegészítő anyag, valamint szerkezeti rendellenességek, például a transzlokációk. A transzlokáció akkor következik be, amikor egy kromoszóma egy része egy másik kromoszómához kapcsolódik. Bizonyos esetekben két kromoszómát cserélnek ki (kiegyensúlyozott transzlokáció), és más esetekben egy extra darabot adnak hozzá vagy hiányoznak egyetlen kromoszómából.
12. A végeredmény
Végül a végső kariotípus mutatja a kromoszómák teljes számát, a nemet és az esetleges szerkezeti rendellenességeket az egyes kromoszómákkal. A kromoszómák digitális képét a számmal rendezett összes kromoszóma generálja.
A KAROTYPE-TEST KORLÁTOZÁSAI
Fontos megjegyezni, hogy bár a kariotípus vizsgálat nagy mennyiségű információt tud nyújtani a kromoszómákról, ez a teszt nem tudja megmondani, hogy vannak-e specifikus génmutációk, például a cisztás fibrózisokat okozó mutációk. A genetikai tanácsadója segít megérteni mind a kariotípus teszteket, mind pedig azt, amit nem tudnak. További vizsgálatokra van szükség a génmutációk lehetséges szerepének felmérésére a betegségben vagy a vetélésben.
Fontos megjegyezni azt is, hogy időnként a kariotípus vizsgálat nem képes érzékelni néhány kromoszomális rendellenességet, például ha a placenta mozaikossága jelen van.
A jövő
A kórélettani vizsgálat jelenleg a prenatális környezetben meglehetősen invazív, amniocentezist vagy korionikus villus mintavételt igényel. Tanulmányok folynak a sejtmentes DNS értékelésekor egy anya vérmintájában, mint sokkal kevésbé invazív alternatívának a magzat genetikai rendellenességeinek prenatális diagnózisára.
Az alsó sorban várják a kariotípus eredményeit
A kariotípus eredményének várakozásakor nagyon ideges lehet, és a hét vagy kettő, hogy az eredmények elérése érezhető legyen. Fogd azt az időt, hogy a barátaidra és a családodra támaszkodj. Hasznos lehet megtanulni a kóros kromoszómákhoz társuló néhány körülményt is. Bár a kariotípus által diagnosztizált állapotok sok esetben pusztítóak lehetnek, sok ember él ilyen körülmények között, akik kiváló életminőségben élnek.
> Források
- > Kumar, Vinay, Abul K. Abbas és Jon C. Aster. Robbins és a Cotran patológiás betegség alapja. Philadelphia: Elsevier-Saunders, 2015. Nyomtatás.
- > Norton, M. és B. Rink. Az invazív tesztelés indikációinak módosítása a jobb szűrés korában. Szemináriumok a perinatológiában . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J. és R. Lathi. A citogenetika és a molekuláris karyotipizálás összehasonlítása a vetélésminták kromoszóma vizsgálatára. Termékenység és sterilitás . 2017. 107 (4): 1028-1033.