Fluoreszcens in situ hibridizáció
A fluoreszcens in situ hibridizáció (FISH) egyike azon technológiáknak, amelyek a sejtek DNS-vizsgálatát kutatják, különös gének vagy génrészek jelenlétének vagy hiányának keresése céljából.
Az ismert genetikai rendellenességek sokféle rákhoz kötődnek. És a genetikai, nem csak arról beszélünk, öröklés. Egy életen át a sejtek hibákat követhetnek el, ha megosztják és nőnek.
A rákkal kapcsolatos DNS-mutációk halmozódhatnak ezeken a sejtekben.
Hogyan működik a FISH?
A FISH egy olyan módszer, amely fluoreszcens próbákat használ a gének specifikus gének vagy részei (DNS-szekvenciák) kimutatására. Az orvosi központ laboratóriuma és az onkológusok a FISH-t használják a rákos betegek felmérésére, és néha a rákkal diagnosztizált és kezelt beteg monitorozására.
A FISH-t különböző típusú minták felhasználásával lehet elvégezni a gyanítható fekvés helyének és típusának megfelelően: Perifériás vérből, csontvelőbiopsziából vagy nyirokcsomó-biopsziából és formalin rögzített paraffinba ágyazott szövetből nyert tumorsejtek (ez a a laboratóriumban feldolgozott és egy viasz típusba ágyazott szövetminta, amely még merevebbé teszi, hogy vékony részekre szeleteljük és mikroszkóp alatt megtekinthetővé tegyük őket).
Mit jelent a levelek?
A FISH "H" jelentése hibridizáció.
A molekuláris hibridizáció során szignálként jelölt DNS- vagy RNS-szekvenciát használunk - vizuálisan ábrázoljuk a piros Lego téglát, ha akarod. A szondát egy Lego-tégla vagy DNS-szekvencia megtalálására használják biológiai mintában.
A DNS a mintában olyan, mint a Lego-téglák, és a legtöbb ilyen téglák nem egyeznek a vörös próbával.
És az összes téglát szépen rendezik 23 pár tégla cölöpökbe - minden halom egyike a párosított homológ kromoszómáinak, többé-kevésbé. A Lego-téglákkal ellentétben a piros Lego-szonda olyan, mint egy erős mágnes, és megtalálja a mérkőzését anélkül, hogy a cölöpöket át kellett volna rendeznie.
Az "F" fluoreszcenciára utal. A vörös szonda elveszhet a téglák cölöpökében, ezért színes fluoreszkáló festékkel jelöljük, hogy elöntsön. Amikor megtalálja a mérkőzést a 23 párosított cölöp közé, egy fluoreszcens címke feltárja helyét. Tehát most már láthatja, hogy a kutatók és a klinikusok hogyan használhatják a FISH-ot, hogy segítsen azonosítani, hogy egy adott gén hol található (melyik halom vagy kromoszóma).
Az "I" és az "S" in situ állnak . Ez utal arra a tényre, hogy a piros Lego téglánk az Ön által megadott mintán keresi a mérkőzését.
Mi a helyzet a specifikus vérrákokkal?
A FISH-t és más in situ hibridizációs eljárásokat használnak a kromoszómális rendellenességek - a genetikai anyag változásai, a kromoszómák változásainak diagnosztizálására, beleértve a következőket:
Törlés - a kromoszóma egy része eltűnt
A transzlokáció - az egyik kromoszóma része elszakad és egy másik kromoszómára tapad
Inverzió - a kromoszóma egy része megszakad és újra beillesztésre kerül, de fordított sorrendben
Duplikáció - a kromoszóma egy része a cellában túl sok példányban van jelen
A rák minden típusának saját kromoszomális változásai és releváns próbái lehetnek. A FISH nemcsak segít azonosítani a kezdeti genetikai változásokat egy olyan betegség folyamatában, mint a rák, hanem a terápiára és a betegség remisszióra adott reakció nyomon követésére is felhasználható.
A FISH által észlelt genetikai változások néha további információt nyújtanak arról, hogy az egyén rákos megbetegedése hogyan viselkedik, a múltban megfigyelt hasonló rákos megbetegedéseken és hasonló genetikai változásokon alapulva. Néha a FISH-t a diagnózis elvégzése után használják fel, hogy további információkat gyűjtsön, amelyek segíthetnek megbecsülni a beteg kimenetelét vagy a legjobb kezelést.
A FISH azonosítja a leukémiák kromoszomális rendellenességeit , beleértve a krónikus limfocitás leukémiát (CLL). Krónikus limfocitikus leukémia / kis limfocita lymphoma esetében a FISH lehetővé teszi a betegek számára, hogy megismerjék prognosztikai kategóriájukat: jó, közepes vagy szegény. Akut limfoblasztikus leukémiában (ALL) a leukémiás sejtek genetikája megmondhatja Önt a rák kockázati szintjéről, és segít a terápiás döntések meghozatalában.
A FISH panelek szintén rendelkezésre állnak limfóma, többszörös myeloma, plazma sejt proliferatív rendellenességek és myelodysplastic szindróma számára. A köpenysejtes limfóma esetében például van egy transzlokáció, amelyet a FISH képes kimutatni GH / CCND1 t (11; 14) néven, amely gyakran társul ehhez a lymphomához.
Miért a FISH?
A FISH egyik előnye, hogy nem kell aktív sejtekre osztani. A citogenetikai vizsgálatok általában körülbelül három hétig tartanak, mivel a rákos sejteknek laboratóriumi edényekben kb. 2 hétig meg kell növekedniük, mielőtt tesztelhetők. Ezzel szemben a FISH eredmények általában néhány nap alatt elérhetőek a laboratóriumban.
> Források:
> Rákos citogenetikai tesztelés CPT kódok.
> Fluoreszcens in situ hibridizáció (FISH). http://www.genome.gov/10000206#al-2.
> Fluoreszcens in situ hibridizáció (FISH). http://www.nature.com/scitable/topicpage/fluorescence-in-situ-hybridization-fish-327.
> Wolff DJ, Bagg A, Cooley LD, et al. Útmutató a hematológiai rendellenességek fluoreszcens helyes hibridizációs teszteléséhez. A Journal of Molecular Diagnostics: JMD. 2007-ben; 9 (2): 134-143.